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高效液相色譜儀常規分析操作步驟及規程

放大字體  縮小字體 發布日期:2007-05-14  瀏覽次數:8338


高效液相色譜儀操作步驟: 

1). 過濾流動相,根據需要選擇不同的濾膜。

2). 對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。

3). 打開HPLC工作站(包括計算機軟件和色譜儀),連接好流動相管道,連接檢測系統。

4). 進入HPLC控制界面主菜單,點擊manual,進入手動菜單。

5). 有一段時間沒用,或者換了新的流動相,需要先沖洗泵和進樣閥。沖洗泵,直接在泵的出水口,用針頭抽取。沖洗進樣閥,需要在manual菜單下,先點擊purge,再點擊start,沖洗時速度不要超過10 ml/min。

6). 調節流量,初次使用新的流動相,可以先試一下壓力,流速越大,壓力越大,一般不要超過2000。點擊injure,選用合適的流速,點擊on,走基線,觀察基線的情況。

7). 設計走樣方法。點擊file,選取select users and methods,可以選取現有的各種走樣方法。若需建立一個新的方法,點擊new method。選取需要的配件,包括進樣閥,泵,檢測器等,根據需要而不同。選完后,點擊protocol。一個完整的走樣方法需要包括:a.進樣前的穩流,一般2-5分鐘;b.基線歸零;c.進樣閥的loading-inject轉換;d.走樣時間,隨不同的樣品而不同。

8). 進樣和進樣后操作。選定走樣方法,點擊start。進樣,所有的樣品均需過濾。方法走完后,點擊postrun,可記錄數據和做標記等。全部樣品走完后,再用上面的方法走一段基線,洗掉剩余物。

9). 關機時,先關計算機,再關液相色譜。

10). 填寫登記本,由負責人簽字。

注意事項:

1). 流動相均需色譜純度,水用20M的去離子水。脫氣后的流動相要小心振動盡量不引起氣泡。

2). 柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要讓液體過柱子。

3). 所有過柱子的液體均需嚴格的過濾。

4). 壓力不能太大,最好不要超過2000 psi
 

 
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