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高效液相色譜法概述

放大字體  縮小字體 發布日期:2010-08-27  瀏覽次數:7615
核心提示: 高效液相色譜法(high performanc, liquid chromatography,HPLC)是在經典液相色譜法基礎上發展起來的一種新型分離、分
 高效液相色譜法high performanc, liquid chromatography,HPLC是在經典液相色譜法基礎上發展起來的一種新型分離、分析技術。經典液相色譜法由于使用粗顆粒的固定相,填充不均勻,依靠重力使流動相流動,因此分析速度慢,分離效率低。新型高效的固定相、高壓輸液泵、梯度洗脫技術以及各種高靈敏度的檢測器相繼發明,高效液相色譜法迅速發展起來。

高效液相色譜法與經典液相色譜法比較,具有下列主要特點:

1.高效由于使用了細顆粒、高效率的固定相和均勻填充技術,高效液相色譜法分離效率極高,柱效一般可達每米104理論塔板。近幾年來出現的微型填充柱(內徑lmm)和毛細管液相色譜柱(內徑0.05umm),理論塔板數超過每米105,能實現高效的分離。

2.高速由于使用高壓泵輸送流動相,采用梯度洗脫裝置,用檢測器在柱后直接檢測洗脫組分等,HPLC完成一次分離分析一般只需幾分鐘到幾十分鐘,比經典液相色譜快得多。

3.高靈敏度紫外、熒光、電化學、質譜等高靈敏度檢測器的使用,使 HPLC 的最小檢測量可達 10-910-11g

4.高度自動化計算機的應用,使 HPLC 不僅能自動處理數據、繪圖和打印分析結果,而且還可以自動控制色譜條件,使色譜系統自始至終都在最佳狀態下工作,成為全自動化的儀器。

5.應用范圍廣(與氣相色譜法相比)  HPLC 可用于高沸點、相對分子質量大、熱穩定性差的有機化合物及各種離子的分離分析。如氨基酸、蛋白質、生物堿、核酸、甾體、維生素、抗生素等。

6.流動相可選擇范圍廣  它可用多種溶劑作流動相,通過改變流動相組成來改善分離效果,因此對于性質和結構類似的物質分離的可能性比氣相色譜法更大。

7.餾分容易收集  更有利于制備。

編輯:foodyy

 
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